在测定二氯荧光素食,激发波长和发射波长如何获得

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/04/30 17:20:45

在测定二氯荧光素食,激发波长和发射波长如何获得
在测定二氯荧光素食,激发波长和发射波长如何获得

在测定二氯荧光素食,激发波长和发射波长如何获得
一般可将仪器的激发波长(Ex)先设定为200nm,然后进行发射波长(Em)模式扫描,(Em)波长范围暂设定为210－800nm,然后记录所有出现的峰值波长；改变激发波长(Ex)后再扫描,如第二次发射图谱中的某个（或某些）峰的位置没有位移（或位移很少）,一般来说这个（或这些）峰就是荧光峰；因为荧光峰的位置是不随激发波长的改变而改变的,仅是峰高（或峰面积）发生改变.
将确定的荧光峰的波长作为发射波长(Em)固定下来,再做激发波长(Ex)的扫描,激发波长的范围要小于发射波长（根据斯拖克斯定律）；如果仅出一个峰则很简单确立下来,再将这个波长固定下来重新做真正的发射波长(Em)扫描,可以得到良好的信噪比的结果值；如果做激发波长(EX)扫描后出现几个峰,则需要作出选择,一般选择峰形高度适合并又有一定带宽的峰为激发波长.

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