酶基因缺失表达出现怪异现象我对甘露聚糖酶基因的ORF进行5’端和3’端进行缺失表达,经过信号肽预测后发现5'端前27个AA是信号肽,我就试着(一)切除5'端前33个AA,PCR酶切连接到pET28A里进行

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/01 13:16:36
酶基因缺失表达出现怪异现象我对甘露聚糖酶基因的ORF进行5’端和3’端进行缺失表达,经过信号肽预测后发现5'端前27个AA是信号肽,我就试着(一)切除5'端前33个AA,PCR酶切连接到pET28A里进行

酶基因缺失表达出现怪异现象我对甘露聚糖酶基因的ORF进行5’端和3’端进行缺失表达,经过信号肽预测后发现5'端前27个AA是信号肽,我就试着(一)切除5'端前33个AA,PCR酶切连接到pET28A里进行
酶基因缺失表达出现怪异现象
我对甘露聚糖酶基因的ORF进行5’端和3’端进行缺失表达,经过信号肽预测后发现5'端前27个AA是信号肽,我就试着
(一)切除5'端前33个AA,PCR酶切连接到pET28A里进行表达,有活性,(用透明圈法确定)
(二)切除5'端前40个AA,PCR酶切连接到pET28A里进行表达,无活性,
(三)切除3'端50个AA,PCR酶切连接到PET28A里进行表达,有活性,
(四)切除3'端60个AA,PCR酶切连接到PET28A里进行表达,无活性,
那么我同时切除5'端得33个AA和3'的50个AA,按理应该有活性,但是实验结果却是无活性
这是怎么回事呢?请大虾们帮我分析一下
我用我仅有的一点生物信息学知识对核酸序列和氨基酸序列进行了一些分析:
5'前27个AA为信号肽
中间大概300AA是GH26(糖苷水解酶26族)
核酸序列很新,用NCBI的BLAST无相关信息。

酶基因缺失表达出现怪异现象我对甘露聚糖酶基因的ORF进行5’端和3’端进行缺失表达,经过信号肽预测后发现5'端前27个AA是信号肽,我就试着(一)切除5'端前33个AA,PCR酶切连接到pET28A里进行
个人猜测:N端和C端部分序列虽然不是催化活性中心,但是对酶的高级结构维持具有一定作用,当同时缺失两端的序列时酶的高级结构无法维系,导致了酶的失活.
到底为什么恐怕还是要做具体序列的结构分析,本人不懂生物信息学,呼唤牛人出现分析你的序列(百度上应该没有).

酶基因缺失表达出现怪异现象我对甘露聚糖酶基因的ORF进行5’端和3’端进行缺失表达,经过信号肽预测后发现5'端前27个AA是信号肽,我就试着(一)切除5'端前33个AA,PCR酶切连接到pET28A里进行 遗传背景不清楚的酵母中,如何分离得到某种酶的编码基因?如果一株酵母的遗传背景不清楚,如何从中分离得到某种酶(如β-葡聚糖糖苷酶)的编码基因?如何对上述分离得到的基因的表达产物 如果一个基因的中部缺失了1个核苷酸对,正好为起始密码子缺失,会不会有Pr的表达? 酵母菌的细胞壁的主要成分是葡聚糖和甘露聚糖为什么?葡聚糖和甘露聚糖 又是什么? 唐山大地震发生前夕出现过什么怪异现象吗? 关于基因缺失如果一个基因中部缺失了一个核苷酸对,不可能出现的后果是A没有蛋白质产物B所控制合成的蛋白质减少多个氨基酸B为什么不可以 当今社会为什么会出现道德滑坡,诚信缺失等现象 我老婆地贫缺失型检测 基因缺失,aa/-SEA .我的是地贫基因点突变发生CS点突变 这对孩子有什么影响吗 pcsk9基因功能获得型和缺失型突变真核表达载体的构建及初步鉴定 肖文虎2010年的论文 谁有发个给我啊? 人白化病(A-a控制)和镰刀型细胞贫血症( B-b控制)两对基因位于两对常染色体上,假设白化病基因与相对应的正常基因相比,白化基因缺失了一个限制酶的切点.图一表示某家族遗传系谱图,图二表 基因突变包括基因对的增添与缺失 为什么书上说基因突变总基因数不变 染色体变异为什么不能产生新基因,不是有缺失等现象吗 我的结果是基因缺失(3.7型),a-地贫2基因杂合子(-a/aa).我老婆的是a-地贫1基因杂合子(--/aa).对BB有影响吗?都26周了, 什么对基因表达调节 世界上有多少怪异现象 如果大肠杆菌的某一基因缺失了一个核苷酸对,不可能出现的后果是为什么会出现控制合成的蛋白质减少多个氨基酸为什么会没有蛋白质不产生的情况》?如果启动子的核苷酸缺失呢?启动子是 地中海贫血1基因(SEA)基因缺失 检测到a珠蛋白基因a3.7型基因缺失DNA序列(-a3.7/aa型a-地贫杂合子,静止型)我跟我老婆都是这样的结果,对BB有影响吗?BB20周了.