细胞过表达中质粒如何构建及转染?本人才开始接触,期待基础知识、注意事项及技能.

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/29 07:26:29
细胞过表达中质粒如何构建及转染?本人才开始接触,期待基础知识、注意事项及技能.

细胞过表达中质粒如何构建及转染?本人才开始接触,期待基础知识、注意事项及技能.
细胞过表达中质粒如何构建及转染?
本人才开始接触,期待基础知识、注意事项及技能.

细胞过表达中质粒如何构建及转染?本人才开始接触,期待基础知识、注意事项及技能.
跟一般的片段插进质粒构建一样啊 只是过表达的话扩增出来的片段必须包含该基因完整的CDS序列 然后插入位点要在质粒的promoter后面 序列不能有突变 转染也和别的一样 用Lipo啥的

首先确定你是要做原核过表达或是真核过表达,两种的过表达载体不一样,而且不同的细胞中过表达用的promoter也不太一样,你要自己好好查查。选定载体后,构建质粒,先放入克隆菌中大量扩增,提取质粒。原核的话,直接转化表达菌表达就行了,真核的话需要进行细胞转染,简单点可以去买转染试剂盒,再按操作步骤进行转染就行了。...

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首先确定你是要做原核过表达或是真核过表达,两种的过表达载体不一样,而且不同的细胞中过表达用的promoter也不太一样,你要自己好好查查。选定载体后,构建质粒,先放入克隆菌中大量扩增,提取质粒。原核的话,直接转化表达菌表达就行了,真核的话需要进行细胞转染,简单点可以去买转染试剂盒,再按操作步骤进行转染就行了。

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细胞过表达中质粒如何构建及转染?本人才开始接触,期待基础知识、注意事项及技能. 质粒转染细胞不表达的问题~想研究某跨膜蛋白,构建真核表达质粒(构建了多种,载体有PCDNA3.1-FLAG,PCDNA3,1-V5,PCMV-5'端MYC,PCDNA3-5'FLAG,PCDNA3-5'HA),转染始终不表达,细胞换过293T,AD293,COS1,COS7等,转染操 做质粒转染293T细胞,提取质粒后用单酶切嘛?为啥是稳定转染,构建一个细胞系 我构建了一个基因的真核表达载体,转染293T细胞后以空质粒PCDNA3.1及未转染质粒的孔为对照,还有一个以PBS代替一抗的未转染质粒的孔为对照,结果只有PBS代替一抗的孔未被染色,其余孔都被染色 如何让一个细胞过度表达某种基因,来观察此基因的作用,瞬时转染和稳定转染都用什么方法转染时每个细胞只近入一个质粒还是很多质粒,过度表达的标准是什么呢 cos-7细胞是真核还是原核细胞?如果要转染入这个细胞的话,构建的质粒必须是pcDNA这个载体吗?另外请问这个 pcDNA3.1 /CT-GFP-TOPO是什么意思?如何翻译?如果要转染进COS-7细胞的话如何选择表达载体 干细胞如何转染质粒 不知哪家公司可以做质粒转染细胞?我最近构建完质粒,正在做质粒转染细胞,可是发现转染后细胞死亡率高,转染效果不理想,考虑要不要改做慢病毒感染,不知哪家公司可以做? 真核过表达质粒,原核过表达质粒的区别~比如我需要过表达人恶性黑色素瘤细胞中的某蛋白,能在大肠杆菌中扩增后,转染到人恶性黑色素瘤细胞中,那么我需要的质粒是真核还是原核? 哪里可以做载体质粒构建,并转染细胞?求推荐. 哪一家公司可以进行载体质粒构建,并转染细胞?求推荐. 转染的cas9质粒在细胞中能复制吗 共转染是将两个基因构建到一个载体上,再转染的意思吗,还是两个基因构建到两个载体,再将两个载体转染?但是质粒不相容啊,可以转两个质粒到同一细胞吗? 哪里细胞的质粒转染做得好? 质粒载体如何构建 请问HEK293细胞如何将质粒转染进去,有没有具体的步骤?我有lipo2000 关于构建质粒的cDNA药物处理细胞后某基因过表达了,想构建该基因的过表达质粒,是否可以用药物处理细胞后提RNA逆转录成cDNA再P全长再连接质粒?这种方法可取吗? 如何构建过表达载体?(分子生物学)