质谱能测聚丙烯酰胺电泳中不同普带酯酶同工酶分子量及结构吗电泳跑出来的条带,不知道能否像2D那样挖胶测分子量

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/04/29 16:49:29

质谱能测聚丙烯酰胺电泳中不同普带酯酶同工酶分子量及结构吗电泳跑出来的条带,不知道能否像2D那样挖胶测分子量
质谱能测聚丙烯酰胺电泳中不同普带酯酶同工酶分子量及结构吗
电泳跑出来的条带,不知道能否像2D那样挖胶测分子量

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可以把含蛋白质的聚丙烯酰胺胶分别挖下来,做胶内酶解（用测序级trypsin）,使蛋白质变成肽端,再采用乙腈等化学溶剂将其萃取出来,除盐,冻干.用碳酸氢铵复溶,上ESI-LTQ质谱,测每段肽的序列,然后通过数据库搜索,用鉴定到的肽去mapping蛋白质.但是如果用ESI-LTQ,很有可能无法鉴定蛋白质的isoform,但是可以得到蛋白质的序列.如果事先不酶解,采用MALDI-TOF,可以对蛋白质的总分子量进行精确鉴定,但是序列信息不容易得到.
无论使用哪种质谱方法,最多能够得到的蛋白质的一级序列,无法得到更高级的序列信息.

可以的

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