作业帮石蜡切片的制作方法?
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/04/20 17:23:19
石蜡切片的制作方法?
石蜡切片的制作方法?
石蜡切片的制作方法?
肠道的石蜡切片的制作
（1）\x05取材：用锋利的刀切取罗非鱼的一小段前肠（据胃5cm左右位置的前肠）,组织块的规格为 5mm×3～5mm×10～15mm.
（2）\x05固定：采用Bouin氏固定液装瓶固定,固定液用量一般为组织块体积的10～20倍.
（3）\x05冲洗：固定12～24h后,将材料自固定液中取出后,在70%酒精中换洗几次,可在酒精中加几滴氨水至洗去黄色为止.
（4）\x05脱水：70%酒精（1h）→80%酒精（1h）→90%酒精（1h）→95%酒精（1h）→无水乙醇Ⅰ（1h）→无水乙醇Ⅱ（1h）
（5）\x05透明：无水乙醇与二甲苯溶液（1:1）（1h）→二甲苯Ⅰ（1h）→二甲苯Ⅱ
（1h）
（6）\x05浸蜡：浸蜡的全过程应在恒温设备中进行,将恒温箱调至58℃.
二甲苯与石蜡混合液（1:1）（1h）→石蜡Ⅰ（1h）→石蜡Ⅱ（1h）
浸蜡必须彻底,否则组织内残留透明剂会造成切片过程的困难和影响切片
的质量.
（7）\x05包埋：在小纸盒内注入溶化的石蜡,将已浸蜡的组织块置入其内,使蜡块迅速冷却硬固,组织块在蜡块中可长期保存.
（8）\x05切片：包埋后的组织块经修整后,用切片机切成5~7μm的石蜡带.
（9）\x05粘片：将组织石蜡带在50摄氏度的温水中展片,然后用经1%HCl溶液处理干净的载玻片捞片,组织带即可粘在载玻片上.
（10）\x05烤片：将粘好的载玻片置于35℃左右的温箱中烤干,待2~3小时后,即可取下编号.
（11）\x05苏木精—伊红染色：将烤干的片进行染色.
①脱蜡：将烤干的切片放入二甲苯(I)10min→二甲苯(Ⅱ)10rain.
②复水：将脱蜡后的切片移入100％酒精5min→95％酒精5min→85％酒精5min→70％酒精5min→蒸馏水5min
③HE染色显示肠道黏膜上皮内淋巴细胞：将蒸馏水洗涤后的切片移入Harris苏木精液中,10min,使细胞核着色；用自来水洗去切片上残余染液；用1％的盐酸酒精分色3秒；用自来水浸洗3h,显微镜下观察,直到胞核蓝化为止；然后切片入曙红溶液中染色5min,使细胞质着色.经95％酒精与100％酒精脱水,二甲苯透明后,中性树胶封片.
④奥新兰一沙黄染色显示肠道内肥大细胞：切片常规脱蜡下行至蒸馏水→奥新兰一沙黄液染色15～20min→蒸馏水速洗,镜检→95％和100％酒精分色脱水1—2min→二甲苯透明→中性树胶封片.
⑤阿利新兰醋酸染色显示肠道内杯状细胞：切片经脱蜡下行入蒸馏水→阿利新兰醋酸染色10min→蒸馏水洗→1％高碘酸水液氧化5min→蒸馏水略洗一Schiff试剂染色（37℃恒温箱）30min→普通水洗3次→蒸馏水2min→Ehrlich苏木精染色5min→95％酒精和100％酒精脱水→二甲苯透明,中性树胶封片.
切片经脱蜡下行入水：二甲苯(30 min)一二甲苯(10 min)一无水乙醇(5 min)一无水乙醇(5 min)一
95％ 乙醇(5 min)一85％乙醇(5 min)一70％ 乙醇(5 min)一流水冲洗(20 min).人Ehrlich苏木精染
色12 min,蒸馏水速洗.盐酸酒精分色,镜检控制时间.入伊红染色2 min,蒸馏水略洗.盐酸酒精分色,镜检控制时间.经95％酒精与无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片.
阿利新兰—番红复合染色液的方法称Scaba法
阿利新兰—番红分别染色的方法称Spicer法